第四章　自身抗体

第一节　概述

自身抗体是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白，患者血液中存在高效价的自身抗体是风湿免疫病的重要特征之一，风湿免疫病多数伴有特征性的自身抗体（谱）。检测自身抗体可实现对疾病的早期预警、诊断与鉴别诊断、病情评估、治疗监测、病程转归及预后判断等。同时，自身抗体的深入研究也可促进对风湿免疫病发病机制的了解。目前临床实验室可开展的自身抗体检测项目已达百项以上（表4-1）。

一、自身抗体的分类

1.疾病标志性自身抗体

只出现于某种自身免疫病中，极少出现于其他疾病中，对风湿免疫病的诊断价值大，但种类较少且灵敏度低，如系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）中的抗Sm抗体（灵敏度20%～40%）。

2.疾病特异性自身抗体

在某种自身免疫病中灵敏度高，在其他疾病也可出现，但阳性率低，如SLE中的抗双链DNA（double stranded DNA，dsDNA）抗体（SLE疾病活动期的灵敏度为70%～80%，特异度为90%～95%），也可见于Ⅰ型自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH），但阳性率低于10%。

3.疾病相关性自身抗体

与某种自身免疫病有密切相关性，但在其他疾病也可出现，如原发性干燥综合征（primary Sjögren syndrome，pSS）中的抗SSA抗体和抗SSB抗体，阳性率分别约为70%和40%，对pSS诊断意义大，但也常出现于SLE中，阳性率分别约为50%和30%。

4.疾病非特异性自身抗体

可在多种自身免疫病中出现，不具疾病诊断特异性，如抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）可见于多种结缔组织病中，也可见于其他自身免疫病、肿瘤、感染及健康人群中。

5.生理性自身抗体

在健康人中可出现的自身抗体，此类自身抗体效价低，不足以引起机体自身组织、细胞的破坏，但可以协助清除衰老蜕变的自身成分，起到免疫自稳作用，其出现的频率和效价可随年龄的增长而增高，常见的自身抗体有ANA、类风湿因子（rheumatoid factor，RF）、抗平滑肌抗体（anti-smooth muscle antibodies，anti-SMA，抗SMA）等。

二、自身抗体的检测方法

临床应用的自身抗体检测方法种类很多，但其检测的核心原理却一致，即抗原与相应抗体之间的特异性结合反应。应用于自身抗体检测的方法有间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence，IIF）、酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、线性免疫印迹法（line immunoassay，LIA）、免疫扩散法、免疫印迹法、免疫沉淀法、对流免疫电泳法、化学发光法、多元微珠免疫检测法、放射免疫法、免疫斑点法、芯片酶联免疫技术等。其中IIF、ELISA、LIA等是目前国内临床实验室最为常用的检测方法。

IIF使用动物组织切片或培养细胞，如HEp-2作为抗原基质，与标本中的自身抗体结合，再用荧光素标记的第二抗体进行检测。可应用于ANA、抗dsDNA抗体、抗中性粒细胞胞质抗体（antineutrophil cytoplasmic antibody，ANCA）、抗角蛋白抗体（anti-keratin antibody，AKA）、抗核周因子（anti-perinuclear factor，APF）、抗SMA、抗肝肾微粒体（liver-kidney microsomal，LKM）抗体、抗线粒体抗体（anti-mitochrondrial antibodies，AMA）等自身抗体的检测。

ELISA常采用间接法进行自身抗体的检测，即将已知的纯化、重组或人工合成的抗原包被在固相载体表面，待测自身抗体与靶抗原进行特异性结合反应后，再与酶标记的第二抗体反应，并通过酶作用于底物以显色判断结果。可应用于抗dsDNA抗体、抗心磷脂抗体（anticardiolipin antibodies，aCL）、抗β₂-糖蛋白Ⅰ（β₂-glycoprotein Ⅰ，β₂-GPⅠ）抗体、抗环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide，CCP）抗体等自身抗体的检测。

LIA将已知的纯化、重组或人工合成的抗原包被在检测膜条上（多为硝酸纤维膜）并完成抗原抗体结合反应，而后亦通过酶-底物反应来判定结果，可应用于抗nRNP/Sm抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Scl-70抗体、抗PM-Scl抗体、抗Jo-1抗体、抗着丝点蛋白B（CENP B）抗体、抗增殖性细胞核抗原（PCNA）抗体、抗核小体抗体、组蛋白抗体、抗核糖体P蛋白（rRNP）抗体、AMA-M2抗体等自身抗体的检测。

目前，化学发光法在国内不断被应用于临床实验室的常规检测，与ELISA相比能实现自动化、快速、定量及随时待机检测，因而被广泛应用于抗心磷脂抗体、抗β₂-糖蛋白Ⅰ抗体、抗髓过氧化物酶抗体、抗蛋白酶3抗体、抗CCP抗体等自身抗体的检测。

三、自身抗体的临床意义

1.应用于自身免疫病诊断与鉴别诊断

如抗Sm抗体对SLE的诊断具有较高特异性，是目前公认的SLE的血清标志抗体，对早期、不典型的SLE的诊断或经治疗缓解后的SLE回顾性诊断有很大帮助。

2.应用于自身免疫病病情评估与治疗监测

如SLE中的抗dsDNA抗体、系统性血管炎（systemic vasculitis，SV）中的抗蛋白酶3（proteinase 3，PR3）抗体和抗髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）抗体。

3.应用于自身免疫病病程转归与预后判断

如局限型系统性硬化（systemic sclerosis，SSc）中抗着丝点抗体（anti-centromere antibodies，ACA）阳性患者预后良好，而弥漫型SSc中抗Scl-70抗体阳性且年长发病患者预后较差。

4.应用自身免疫病预警

如抗CCP抗体早在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）发病前4.5年即可在患者体内出现，AMA可以在原发性胆汁性胆管炎（PBC）患者发病前10年出现。

5.自身免疫病发病机制的研究

通过自身抗体临床应用实践，可进一步研究和阐明风湿免疫病发病机制，如SLE中的ANA与多器官或组织的细胞核结合，从而导致多器官的损伤。